A fenda labial não sindrômica com ou sem fenda palatina (FLNS/P) é uma das malformações congênitas mais comuns em todo o mundo, com uma incidência de 1,2 em 1.000 nascidos vivos.1 Na China, a prevalência de FLNS/P é maior do que em outras populações étnicas (1,48 a 3,27 em 1.000 nascidos vivos).2,3 Atualmente, com o desenvolvimento da cirurgia plástica, mais pacientes com fenda labial ou palatina podem ser submetidos ao reparo cirúrgico;4 no entanto, eles ainda podem apresentar uma série de problemas, como deformação craniofacial e de fala. Além disso, embora instituições de caridade internacionais como a Smile Train tenham fornecido suporte para muitos pacientes, o tratamento da FLNS/P pode representar um custo econômico pesado para algumas famílias, especialmente nos países em desenvolvimento. Portanto, esclarecer as etiologias da FLNS/P é muito importante para o diagnóstico e a prevenção da doença.

As etiologias e a patogênese da FLNS/P são complexas, incluem fatores genéticos e ambientais ou uma combinação dos mesmos.3 Nos últimos anos, com o desenvolvimento de alta tecnologia de sequenciamento e metodologia estatística, o estudo de associação ampla do genoma (GWAS) foi feito para identificar genes candidatos envolvidos no desenvolvimento de FLNS/P.5 As evidências do GWAS identificaram dezenas de loci e genes causadores potenciais de FLNS/P, como o Irf6, Mafb, Grhl3, Abca4, Nog, Spry2, Tpm1, 8q21.3, Crebbp e Vax1.6–10 Entretanto, nas subsequentes reproduções, poucos desses loci/genes mostraram correlações consistentemente positivas em todos os estudos. Na verdade, para mais genes candidatos, resultados inconsistentes foram relatados em populações de diferentes etnias e regiões. Vax1 é um desses genes.

Um GWAS conduzido por Mangold et al. identificou um novo loci, rs7078160, associado a FLNS/P em 10q25 na população europeia.11 Posteriormente, Beaty et al. conduziram outro estudo GWAS em grupos europeus e asiáticos e seus achados confirmaram que o polimorfismo rs7078160 do Vax1 estava correlacionado com FLNS/P.6 Subsequentemente, estudos feitos em populações de mongóis, japoneses, filipinos e vietnamitas apoiaram os resultados acima.12–14 No entanto, pesquisas conflitantes foram relatadas na população chinesa e um estudo de Li et al. descobriu que rs7078160 do Vax1 não estava associado a FLNS/P na população da etnia Han do norte da China.15 Neste estudo, primeiramente investigamos a correlação entre os polimorfismos do Vax1 rs7078160 e o risco de FLNS/P na população de etnia Han do sul da China. Considerando que as amostras de trio completo podem fornecer dados mais confiáveis do que as amostras de caso‐controle, o desenho de caso/controle‐pais foi usado neste estudo, para que pudéssemos detectar as distribuições genotípicas e alélicas do polimorfismo de nucleotídeo único (SNP, do inglês Single Nucleotide Polymorphism) alvo enquanto analisamos os efeitos de origem parental.

A análise do equilíbrio de Hardy‐Weinberg revelou que todos os indivíduos apresentavam equilíbrio genético em rs7078160 (tabela 1). A distribuição dos genótipos e alelos da variante rs7078160 em ambos os grupos de casos e controles é apresentada na tabela 1. As proporções dos genótipos foram 21% AA, 57% AG, 22% GG nos casos e 11,7% AA, 51,7% AG, 36,7% GG em controles. A frequência do alelo G foi de 50,5% nos casos e 62,5% nos controles. As frequências alélicas de rs7078160 no grupo total de casos (p=0,04) e subgrupo FLPNS (p=0,01) foram substancialmente diferentes quando comparadas com o grupo controle; entretanto, as frequências alélicas nos subgrupos FLNS (p=0,19) e FPNS (p=0,43) não foram significantes quando comparadas ao grupo controle (tabela 1).

O OR e IC 95% entre AG+AA e GG para rs7078160 também mostraram diferenças significantes no grupo de casos totais (p=0,04, OR=2,05, IC 95%: 1,01‐4,16) e o subgrupo FLPNS (p=0,01, OR=3,94; IC 95%: 1,34−11,54), enquanto os resultados não foram significantes nos subgrupos FLNS (p=0,24) e FPNS (p=0,68) (tabela 2). O teste de desequilíbrio de transmissão foi feito para trios com estrutura genética em heterozigose e nenhum desequilíbrio transmitido estatisticamente significante foi detectado em rs7078160 (p=0,68) (tabela 3).

O importante papel etiológico de rs7078160 foi relatado pela primeira vez por Mangold et al. em um estudo de associação ampla do genoma em populações europeias com FLNS/P.11 O nucleotídeo de polimorfismo único (SNP) mais suscetível à FLNS/P em 10q25 foi rs7078160 no gene Vax1 (Ventral Anterior Homeobox 1). O Vax1 mostrou ser um gene crucial para o desenvolvimento do prosencéfalo basal e sistema visual em experimentos com animais e também participa da formação rostral de vertebrados.17 Slavotinek et al. relataram que a mutação em Vax1 está associada à fenda labial e palatina humana, ausência da glândula pineal, agenesia do corpo caloso, malformações no hipocampo e pequenos nervos ópticos.18

Até o momento, vários estudos confirmaram a associação entre rs7078160 e FLNS/P em diferentes populações étnicas, inclusive japoneses, poloneses, africanos da África Central e populações do Sudeste da Ásia.12‐14 Entretanto, resultados inconsistentes foram encontrados em chineses, quenianos e outros casos poloneses.15,19,20 Nos chineses, a pesquisa de Li et al. não identificou o risco de Vax1 em FLNS/P na população do norte da China.15 No entanto, recentemente um estudo conduzido por Zhang et al. descobriu que o gene Vax1 era um fator de risco para FLNS/P na população chinesa ocidental de etnia Han. 5 Além da diferença geográfica, os diferentes métodos dos estudos podem ser uma explicação. Os primeiros estudos usaram o desenho de caso‐controle, enquanto Zhang et al. adotaram o desenho de trio caso‐pais.5 Neste estudo, escolhemos a população de etnia Han do sul da China como amostra. As frequências alélicas de rs7078160 no grupo FLPNS foram substancialmente diferentes quando comparadas ao grupo controle (p=0,02, respectivamente) (tabela 1). O OR e IC de 95% entre AG+AA e GG mostraram diferença significativa no grupo de casos totais (p=0,04, OR=2,05, IC de 95%: 1,01‐4,16) e subgrupo FLPNS (p=0,01, OR=3,94, 95% IC: 1,34‐11,54), sugeriu que o alelo A de rs7078160 pode ser um fator de risco para FLNS/P, mas não está associado a FLNS e FPNS (tabela 2). O teste TDT não detectou desequilíbrio transmitido significante em rs7078160 (p=0,68) (tabela 3). Esse resultado foi conflitante com os estudos anteriores de FLNS/P de Li et al., já que eles não encontraram associação de Vax1 e FLNS/P na população de etnia Han do norte da China.15 A inconsistência pode ser devido à diferença geográfica e ao desenho de amostragem diferente; o trio pais‐caso completo pode fornecer informações genéticas mais abrangentes em comparação com o desenho de caso‐controle.

De maneira coletiva, este estudo demonstrou que o polimorfismo rs7078160 está envolvido no desenvolvimento de FLNS/P em indivíduos da etnia Han do sul da China. Nosso estudo forneceu outra evidência para a etiologia de Vax1 em FLNS/P da população chinesa de etnia Han. Entretanto, nosso estudo ainda tem várias limitações potenciais. Primeiro, nos concentramos em apenas um SNP, o rs7078160; o estudo de mais SNPs candidatos poderia aumentar a significância de nosso estudo. Em segundo lugar, devido às dificuldades de coletar as amostras do trio completo, o número de casos e trios de controle era relativamente limitado. O aumento do número de indivíduos fortaleceria nossos resultados. Em terceiro lugar, as interações ambientais e os fatores maternos durante a gravidez não foram avaliados em nosso estudo. Mais esforços ainda são necessários para esclarecer a associação mais profunda entre hereditariedade e meio ambiente.

Este estudo revelou que o polimorfismo rs7078160 está envolvido no desenvolvimento de FLNS/P na população de etnia Han do sul da China, demonstra que Vax1 pode estar associado a FLNS/P. Esses achados podem ser úteis para ampliar nosso conhecimento sobre a etiologia da FLNS/P.

Os autores declaram não haver conflitos de interesse.